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5-26高效液相色譜(HPLC)作為現(xiàn)代分析化學(xué)的"金標(biāo)準(zhǔn)"技術(shù),其性能直接決定分析結(jié)果的可靠性和實驗室檢測效率。系統(tǒng)性能檢測應(yīng)從關(guān)鍵性能參數(shù)、日常操作維護和長期穩(wěn)定性三個維度展開,建立全面的質(zhì)量保障體系。一、關(guān)鍵性能參數(shù)檢測標(biāo)準(zhǔn)1.理論塔板數(shù)(N):通過標(biāo)準(zhǔn)品測試,要求N≥2000/米...
液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。液相色譜儀的用途:1、在聚合物的分析中,吸附色譜一般用來分離添加劑,如偶氮染料、抗氧化劑、表面活性劑等,也可用于石油烴類的組成分析。2、用于氨基酸、蛋白質(zhì)的分析,也適合于某些無機離子(NO3-、SO42-、Cl-等無機陰離子和Na+、Ca2+、Mg...
柱溫箱一般會遇到的問題:1、柱溫箱開機后,屏幕亮了但是沒有顯示。故障分析:柱溫箱顯示屏亮,但是沒有顯示這種情況可能是控制顯示器的電路板接觸不良或是損壞,因為這個部件剛好在靠近柱溫箱門的地方,經(jīng)常開門可能造成信號線松動甚至斷開。解決方法:首先找到柱溫箱底部連接電路板的線,檢查卡槽是否松動,信號線是否有斷開的情況;若信號線無異常,則說明控制電路板壞了,只能找到廠家售后維修。2、柱溫箱發(fā)出警報聲后停止工作。故障分析:柱溫箱報警說明操作過程中有不當(dāng)?shù)男袨槭怪鶞叵錈o法正常工作或者加熱過...
進樣器是將樣品溶液準(zhǔn)確送入色譜柱的裝置,分手動和自動兩種方式。現(xiàn)在的液相色譜儀所采用的手動進樣器幾乎都是耐高壓、重復(fù)性好和操作方便的六通閥進樣器,其原理與氣相色譜中所介紹的相同。隨著HPLC分析儀器的普及和其在自動化程度的提高,自動進樣模式取代了原來手動模式,它大大提高了工作效率,增強了分析的精度,消除了人為誤差等等優(yōu)勢,越來越多的單位使用自動進樣器。一般來說,自動進樣器包括進樣臂、進樣針、樣品盤、清洗系統(tǒng)、驅(qū)動系統(tǒng)以及控制系統(tǒng)等部分組成,各個部分之間緊密合作,共同帶動著自動...
在使用高效液相色譜系統(tǒng)進行日常分析檢測的過程中,有時會遇到色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的問題,導(dǎo)致無法對組分進行準(zhǔn)確定量。出峰面積重現(xiàn)性差的話,首先要看保留時間是否穩(wěn)定。如果保留時間都不穩(wěn)定,那也不用說出峰面積的穩(wěn)定了。而保留時間的穩(wěn)定性,跟系統(tǒng)的壓力、流動相比例、流動相的脫氣以及色譜柱都有關(guān)系。導(dǎo)致色譜峰峰面積重現(xiàn)性差的常見原因及解決方法:1、檢查進樣量及進樣操作進樣量不符合要求或者進樣時操作失誤,都可能導(dǎo)致色譜峰面積重現(xiàn)性差。如果是使用手動進樣器且方法要求進樣量小于定量環(huán)體積,必...
液相色譜柱的損壞70-80%都是由于柱壓升高導(dǎo)致的,色譜柱使用了一段時間以后,壓力會有所升高,達到一定程度以后色譜柱就會報廢,如果在一天之內(nèi)壓力升高了2-5個mpa,或者在幾次使用后壓力就翻倍的升高,這些都是異常狀況,那建議進行排除。一、色譜柱保存不當(dāng)原因:色譜柱如較長時間不用,重新啟用后需按說明書的活化方法重新活化后再使用,否則也會出現(xiàn)柱壓升高,柱效下降。解決辦法:按說明書重新活化色譜柱。原因:除另有規(guī)定外,一般反相色譜柱都需保存在高比例有機相中,以防止微生物滋生。否則,重...
標(biāo)準(zhǔn)曲線法,分為外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。外標(biāo)法在液相色譜中用的較多。內(nèi)標(biāo)法準(zhǔn)確但是麻煩,在標(biāo)準(zhǔn)方法中用的較多。1、外標(biāo)法用被測化合物的純品作為標(biāo)準(zhǔn)樣品,配制成一系列的已知濃度的標(biāo)樣。注入色譜柱的到其響應(yīng)值(峰面積)。在一定范圍內(nèi),標(biāo)樣的濃度與響應(yīng)值之間存在較好的線性關(guān)系,即W=f×A,制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。在*相同的實驗條件下,注入未知樣品,得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f,即可求出欲測組分的濃度。外標(biāo)法的優(yōu)點:操作、計算簡單,是一種常用的定量方法;無需各組分都被檢出、洗脫;需要標(biāo)樣;...
紫外檢測器的使用覆蓋面達到HPLC檢測器的75%,在各個領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用,特別是在藥品、環(huán)保、生命科學(xué)、糧食科學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品科學(xué)、醫(yī)療衛(wèi)生等領(lǐng)域,應(yīng)用更加廣泛。國際上生產(chǎn)HPLC的廠商很多,無一不帶紫外檢測器。中國也有10幾家生產(chǎn)HPLC的企業(yè)?;旧隙紟ё贤鈾z測器。有的HPLC只有紫外檢測器一種,而無其它類型的檢測器。紫外檢測器不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性,而且對環(huán)境溫度、流動相組成變化和流速波動不太敏感,因此既可用于等度洗脫,也可用于梯度洗脫。...
C18色譜柱因鍵合方式的不同、粒徑的不同、長度的不同,內(nèi)徑的差異等多方面因素,呈現(xiàn)出不同選擇性。這樣,在市場上就出現(xiàn)了數(shù)百種具有不同分離選擇特性的C18色譜柱。對于傳統(tǒng)的C18色譜柱,pH值使用范圍通常為2~7,因為pH值高于8時C18固定相會受到限制。由于殘余硅羥基的存在,易對堿性化合物造成不可逆吸附,造成峰拖尾,影響分離與分析。pH值太低則會使鍵合的烷基脫落,而且對成分的分離達不到要求。1、酸性條件下C18的選擇為了改善C18色譜柱在低pH值時的穩(wěn)定性,有人提出了空間位阻...
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